【多组学和临床转化系列】送样前先核对：临床组学取材的 8 个常见问题

手术室取下组织，病理取材后还有一份留给科研。此时才问“放保存液还是直接冻存”，往往已经被动。保存方案要在取材前定好。

测整体 RNA、活细胞、蛋白或代谢物，对材料的要求并不相同。下面这份清单可以用于与取材、病理和检测人员核对。具体时限和尺寸，仍以检测平台验证过的流程为准。

送样前，这 8 件事核对了吗？

1. 离体时间记全了吗？ 记录离体、处理和保存时间。延迟可能影响检测，影响程度取决于组织和检测对象，不能只凭“放了多久”判断是否可用。

2. 取材位置可比吗？ 肿瘤中心、浸润边缘和坏死区不能随意替换。保留病理评估和位置记录，才能理解两组究竟在比较什么。

3. 组织块大小合适吗？ 组织太大可能冻不透，保存液也可能渗透不足。按组织类型和具体流程分切，不套用统一尺寸。

4. 保存方式提前确认了吗？ RNA 保存液、细胞冻存液和直接速冻不能随意替代。干冰用于运输保低温，不是保存液。

5. 会不会反复冻融？ 冻融可能影响 RNA 完整性，也可能影响部分蛋白和代谢物。提前按用量分装，记录冻融次数。

6. 血液检测对象说清了吗？ PBMC 是外周血单个核细胞；血浆游离核酸是不在完整细胞内的核酸；细胞外囊泡是细胞释放的膜性小囊泡。三者的采血管、处理时限和离心条件不能一刀切。

7. 每批都有各比较组吗？ 尽量让每个处理、建库批次都包含各组。建库就是把材料制成可供测序的文库，同时记好操作者和试剂批号。

8. 临床资料跟上了吗？ 治疗史、分期、病理亚型等与研究问题有关的信息，要和样本同步收集。

疾病组冻得晚，差异就一定是延迟造成的吗？

假设疾病组总比对照组晚冻存，结果发现两组表达不同。此时只能确认存在前处理混杂风险：疾病因素和处理因素缠在一起，难以区分各自影响。

不能直接把差异全归因于疾病，也不能全归因于取材延迟。先核对记录，再判断哪些问题仍能回答、哪些解释需要保留。

清单最实际的作用是什么？

让每份样本的经历有据可查。它不能消除所有风险，但能让可调整的环节尽早被发现，也让后续分析有依据可循。

参考阅读

• RNA-seq RNAaccess identified as the preferred method for gene expression analysis of low quality FFPE samples. *PLoS One*, 2023.

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