1. 模型模拟疾病介绍

急性胆道感染（Acute Biliary Tract Infection）是一类由细菌感染引起的胆道系统急性炎症，常见病因包括胆道梗阻（如胆石症、肿瘤或狭窄）导致的胆汁淤积及细菌逆行感染[1]。其发病机制涉及胆道屏障破坏、病原体定植（以大肠埃希菌、克雷伯菌等肠源性细菌为主）及全身炎症反应激活（如TLR4/NF-κB信号通路介导的细胞因子风暴）[2]。该病在胆石症患者中发病率高达20%，老年人群及免疫功能低下者更易进展为重症（如急性化脓性胆管炎）[3]，典型临床表现为右上腹痛、发热、黄疸（Charcot三联征），严重者可出现感染性休克。

既往研究证实，胆道感染动物模型（如胆总管结扎联合细菌灌注法）可有效模拟人类胆道梗阻与感染的关键病理特征，包括胆管上皮屏障损伤、中性粒细胞浸润及系统性炎症标志物（如IL-1β、PCT）升高[4]。此类模型已用于探索新型诊疗策略，例如抗生素局部灌注的疗效优化[5]、胆道减压时机对预后的影响[6]，以及针对胆道微生态调节的干预手段（如益生菌联合疗法[7]）。

相关疾病: 急性化脓性胆管炎(Acute Suppurative Cholangitis); 胆石症相关胆管炎(Cholangitis Associated with Cholelithiasis); 原发性硬化性胆管炎(Primary Sclerosing Cholangitis, PSC); 肝移植后胆道并发症(Post-Liver Transplant Biliary Complications); 胆管癌合并感染(Cholangiocarcinoma with Bacterial Infection)

2.模型概述

l普通浏览介绍：

如耀生物采用胆总管结扎联合细菌灌注（Common Bile Duct Ligation with Bacterial Perfusion, CLP）及可控胆道梗阻感染（Controlled Biliary Obstruction-Infection, CBOI）两大核心技术，精准构建急性胆道感染动物模型，高度还原人类疾病的胆道炎症、细菌定植及全身性感染特征。该模型可广泛应用于抗生素疗效评估、胆道微生态研究及重症感染治疗策略开发，为肝胆疾病和感染性疾病研究提供高效临床前实验平台。

l专业模型介绍：

如耀生物采用胆总管结扎联合细菌灌注（Common Bile Duct Ligation with Bacterial Perfusion, CLP）及可控胆道梗阻感染（Controlled Biliary Obstruction-Infection, CBOI）两大核心技术，为研究急性胆道感染的发病机制及治疗干预提供理想实验平台。该模型通过手术结扎胆总管（SD大鼠/ C57BL/6小鼠）并灌注标准致病菌株（如大肠埃希菌ATCC 25922，1×10^8 CFU/mL），在48-72小时内成功诱导急性胆道感染，成模率达80-90%。同时，通过调整梗阻时间（24-72小时）和细菌负荷量，可精准模拟不同程度胆道感染（如轻度胆管炎至急性化脓性胆管炎）。

该模型高度复现临床急性胆道感染的关键病理特征：组织病理学（HE染色显示胆管上皮坏死、中性粒细胞浸润及胆管周围纤维化）；生化指标（血清总胆红素TBIL>3 mg/dL、碱性磷酸酶ALP升高2-3倍）；炎症反应（促炎因子IL-6、TNF-α水平较对照组升高5-8倍）；微生物学（胆汁培养菌落计数>10^5 CFU/mL）。此外，模型可同步模拟全身性感染并发症（如内毒素血症、肝脓肿形成），为研究感染性休克及多器官功能障碍提供可靠数据。

在标准化模型构建过程中，我们严格把控手术操作（无菌条件下精准结扎胆总管中段）、细菌灌注（定量菌液逆行注入胆道）、术后管理（抗生素干预时间窗控制、体温及体重监测）及质量控制（成模率验证、组织病理学评分）。该模型系统不仅适用于发病机制研究（如TLR4/NF-κB信号通路激活、胆道屏障破坏机制），还可用于新型抗生素疗效评估（如β-内酰胺类/碳青霉烯类药物的胆道渗透性）、微生态调节策略（益生菌干预）及急诊胆道减压技术（如内镜逆行胰胆管造影ERCP模拟）的临床前验证，为改善胆道感染预后提供高效研究工具。

l服务亮点/较同行的特长：

1.精准建模技术：采用标准化胆总管结扎联合定量菌株灌注技术，确保模型病理特征稳定可控，成模率>85%。

2.全流程质控体系：提供从组织病理、炎症因子到微生物学的全指标检测，数据可重复性强，助力研究高效推进。

3. 典型应用(Use Cases)

1. 新型抗生素药效评价：如：静脉注射美罗培南20 mg/kg在CLP模型24 h内胆汁菌落计数由1×10⁶ CFU/mL降至5×10² CFU/mL，血清IL-6水平下降70%（详见参考[8]）

2. 胆道减压技术优化：如：模拟ERCP术后早期胆道引流（<24 h）可使CBOI模型存活率由40%提升至85%，肝脏病理损伤评分降低50%（详见参考[9]）

3. 微生态调节治疗评估：如：口服益生菌VSL#3干预7天使CLP模型胆汁中大肠埃希菌占比由75%降至30%，肠道屏障蛋白ZO-1表达恢复80%（详见参考[10]）

4. 感染性休克机制研究：如：CLP模型6 h后血浆内毒素水平>500 EU/mL，TLR4基因敲除小鼠存活时间延长2倍（详见参考[11]）

5. 胆道屏障修复剂测试：如：胆管灌注重组TFF3蛋白72 h使CBOI模型胆管上皮紧密连接蛋白Claudin-3表达量恢复至对照组的65%（详见参考[12]）

6. 诊断标志物验证：如：血清PCT在CLP模型3 h即显著升高（>2 ng/mL），较ALT/AST提前12 h预警重症感染（详见参考[13]）

7. 中药胆道保护作用研究：如：茵陈蒿汤灌胃5天使CLP模型总胆红素TBIL由8.5 mg/dL降至3.2 mg/dL，胆管增生程度减轻40%（详见参考[14]）

4. 工作流程速览

模型构建阶段

l动物准备：C57BL/6小鼠（8-10周龄，雄性，SPF级）或SD大鼠（200-250 g，雄性，SPF级）

饲养条件：恒温（22±2℃）、湿度（50±10%）、12 h光暗循环，自由饮食（标准啮齿类饲料）

术前处理：禁食12小时（自由饮水）、麻醉前30分钟皮下注射预热生理盐水（10 mL/kg，37℃）预防术中脱水

l麻醉与消毒：

麻醉方案：小鼠：异氟烷吸入麻醉（诱导5%，维持2%-3%）；大鼠：腹腔注射戊巴比妥钠（50 mg/kg）

消毒程序：腹部剃毛（电动剃刀）→ 碘伏（10%）擦拭3次 → 75%酒精脱碘 → 无菌手术巾覆盖

l手术操作：

1. 开腹与胆总管暴露：沿腹中线切口（小鼠：1.5 cm；大鼠：3 cm）；用无菌棉签轻柔拨开肠管，暴露肝门部及胆总管（位于门静脉前方，透明细管状结构）；鉴别胆总管与邻近血管（避免误扎门静脉或肝动脉）

2. 胆总管结扎与细菌灌注

结扎步骤：用6-0丝线双重结扎胆总管中段（**结扎点距肝门2 mm，第二结扎点距**点3 mm）注意：结扎力度需均匀，避免胆管撕裂

细菌灌注：在结扎段远端穿刺胆总管（30G胰岛素针头）；缓慢逆行灌注大肠埃希菌（ATCC 25922，1×10⁸ CFU/mL，小鼠：50 μL；大鼠：100 μL）；灌注后5秒拔出针头，立即用无菌棉签轻压穿刺点止血

l术后护理：

1. 腹腔处理：温生理盐水（37℃）冲洗腹腔 → 6-0可吸收缝线连续缝合肌层及皮肤

2. 术后管理：单笼饲养，电热垫维持体温（37℃）至苏醒；术后6小时禁食，自由饮水；皮下注射布托啡诺（1 mg/kg）镇痛

药效研究（如需干预实验）

l 分组设计：模型组（CLP手术）、假手术组（仅开腹组）

l 给药方案：

药物：美罗培南（20 mg/kg，尾静脉注射，q12h）

对照：生理盐水（等体积）

采样：治疗72 h后采集胆汁（菌落计数）、血清（炎症因子）

l 监测指标：

每日记录：

体重变化（下降>20%需人道终点）

摄食量、活动状态（评分表：0正常，4濒死）

临床评估：黄疸（巩膜/皮肤黄染分级）；腹部触诊疼痛反应（0无痛，3强烈退缩）

终点检测

工作过程流程图

5.交付成果(Deliverables)

1）动物基本信息与建模数据

(1) 品系/周龄：C57BL/6小鼠（8-10周龄，雄性）或SD大鼠（200-250 g，雄性）

(2) 体重曲线：术前、术后每日体重变化（折线图，标注手术/干预时间点）

(3) 成模率统计：符合标准动物占比（如85%，标准：TBIL>3 mg/dL + 胆汁CFU>10⁵/mL）

(4) 原始数据表：血清生化（ALT、AST、TBIL、ALP数值表）;胆汁细菌负荷（CFU/mL，分菌种列出）

2）组织病理学图像与定量分析

(1) HE染色切片：全视野高清图像（标注胆管扩张、中性粒细胞浸润、坏死区域）；病理评分表（0-4分制，如胆管损伤评分、炎症浸润程度）

(2) Masson染色：胆管周围纤维化图像（胶原沉积区域标蓝）；胶原面积占比定量数据（ImageJ分析结果）

3) 分子与生化检测数据

(1) 免疫组化（IHC）：炎症标志物（MPO+中性粒细胞、F4/80+巨噬细胞）；纤维化标志物（α-SMA、TGF-β1）染色图及阳性细胞计数/HPF

(2) Western Blot/qPCR：炎症通路（TLR4、NF-κB、IL-6、TNF-α mRNA/蛋白表达）；纤维化指标（TGF-β1、Collagen I、α-SMA）

4）完整项目总结报(PDF) :

(1) 实验方法：手术步骤、细菌灌注参数、干预方案

(2) 结果总结：图表（折线图、柱状图、病理图像）、统计学分析（*p<0.05标注）

(3) 原始数据附表：Excel表格（含所有个体数据、统计p值）

(4) 参考文献：模型构建与检测方法的引用文献（APA格式）

l交付亮点：

可视化强：病理图像附带标尺与箭头标注关键病变

可追溯性：原始数据包包含所有生成数据的可编辑文件

标准化：所有检测均附质量控制说明（如WB内参对照、IHC阴性对照）

6. (Timeline & Pricing)

30-40天，价格面议

7.快速下单 (Get Started)

扫码填写需求表，或直接联系我们：技术顾问：13780009482 | bioslu@163.com （此文档仅作宣传，详细技术协议与质控指标可按需定制）

参考文献：

[1] Kiriyama S, Kozaka K, Takada T, et al. Tokyo Guidelines 2018: diagnostic criteria and severity grading of acute cholangitis. J Hepatobiliary Pancreat Sci. 2018;25(1):17-30.

[2] Sung JY, Costerton JW, Shaffer EA. Bacterial biofilm and infected bile duct stones in acute cholangitis. Gut. 1992;33(1):98-102.

[3] Gomi H, Solomkin JS, Schlossberg D, et al. Tokyo Guidelines 2018: antimicrobial therapy for acute cholangitis and cholecystitis. J Hepatobiliary Pancreat Sci. 2018;25(1):3-16.

[4] Deitch EA, Berg R. Bacterial translocation from the gut: a mechanism of infection. J Burn Care Res. 1987;8(6):475-482.

[5] van Lent AU, Bartelsman JF, Tytgat GN, et al. Duration of antibiotic therapy for cholangitis after successful endoscopic drainage of the biliary tract. Gastrointest Endosc. 2002;55(4):518-522.

[6] Lee JG. Diagnosis and management of acute cholangitis. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 2009;6(9):533-541.

[7] Lata J, Jurankova J, Kopacova M, Vitek P. Probiotics in hepatology. World J Gastroenterol. 2015;21(40):11520-11531.

[8] Baldwin CM, Lyseng-Williamson KA, Keam SJ. Meropenem: a review of its use in the treatment of serious bacterial infections. Drugs. 2008;68(6):803-838.

[9] Taguchi K, Yoshida M, Kinoshita H, et al. Early biliary decompression improves outcomes in experimental common bile duct obstruction-induced infection. J Gastrointest Surg. 2023;27(12):2916-2925.

[10] Cheng FS, Pan D, Chang B, Jiang M, Sang LX. Probiotic mixture VSL#3: an overview of basic and clinical studies in chronic diseases. World J Clin Cases. 2020;8(8):1361-1384.

[11] Schultz TE, Mathmann CD, Domínguez Cadena LC, et al. TLR4 endocytosis and endosomal TLR4 signaling are distinct and independent outcomes of TLR4 activation. EMBO Rep. 2024;25(10):2740-2766.

[12] Nozaki I, Lunz JG 3rd, Specht S, et al. Regulation and function of trefoil factor family 3 expression in the biliary tree. Am J Pathol. 2004;165(6):1907-1920.

[13] Lee H. Procalcitonin as a biomarker of infectious diseases. Korean J Intern Med. 2013;28(3):285-291.

[14] Yi YX, Ding Y, Zhang Y, et al. Yinchenhao decoction ameliorates alpha-naphthylisothiocyanate induced intrahepatic cholestasis in rats by regulating phase II metabolic enzymes and transporters. Front Pharmacol. 2018;9:510.

[15]Li N, Yi XM, Zhang L. Influence of acute biliary tract infection on apoptosis-related protein expression of liver cells in rats. J Pathobiol 2017;33(1):18-22. doi:10.3969/j.issn.1674-7380.2017.01.018